W ramach nowego Rock Band twórcy zawarli 45 kompozycji The Beatles. Wśród nich zamieszczono zarówno kawałki kultowe, jak i te mniej znane, lecz równie dobre, pochodzące z okresu, gdy Paula McCartney’a i spółkę fascynowała psychodelia. Warto zaznaczyć, że pod uwagę przy układaniu ścieżki dźwiękowej wzięte pod uwagę zostały wszystkie albumy z bogatej dyskografii zespołu. Systematycznie baza ta jest uzupełniona o nowe piosenki, udostępniane w paczkach za pośrednictwem serwisów Xbox Live, PlayStation Network oraz WiiConnect24.

To niezwykłe, z punktu widzenia wszystkich zagorzałych fanów lat 60. i muzyki spod znaku ówczesnego rocka i psychodelik, wydawnictwo nie wyróżnia się systemem rozgrywki, który jest identyczny do tego, znanego z dwóch odsłon cyklu Rock Band. W grze zastosowano sprawdzone mechanizmy. Gracze śpiewają do mikrofonów, grają na imitacjach gitar (nawiązującym stylem wykonania do instrumentów The Beatles) oraz uderzają w plastikowe pady perkusji. Zdobywają przy tym punkty, dzięki którym mogą awansować do kolejnych etapów rozgrywki.